[자연과학] 미생물experiment(실험) - Gram(그람) 염색
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작성일 22-12-10 04:31
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2. 재료, 시약, 기구
Escherichia coli (gram 음성간균), Staphylococcus aureus (gram 양성구균), Crystal violet(1차 염색제), Gram iodine(착색제), 95% ethanol(탈색제), Safranin(2차 염색제), 슬라이드 글라스, 백금이, 멸균증류수, 알코올램프, 일회용장갑, 피펫, 초시계 등
3. test(실험) 방법
① 도말- 슬라이드글라스에 멸균 증류수 한 방울을 떨어뜨리고 균(E.coli)을 백금이로 취해서 도말
② Air Dry- 약한 불꽃 위에서 표본을 좌우로 흔들면서 건조시킴
③ Fixing- 도말면을 위로 하여 약한 불꽃 중에서 3번 정도 서서히 통과
④ Straining- Crystal violet을 떨어뜨리고 1분간 방치하여 보라색으로 염색
⑤ Washing- 도말면을 아래로 하여 약하게 물을 틀어 염색액이 묻어나오지 않을 때까지 세척한 뒤 물기를 제거
⑥ Coloring- Gram iodine을 떨어뜨리고 1분간 방치하여 색을 착색시킴
⑦ Washing- 위와 동일한 방법으로 세척한 뒤 물기를 제거
⑧ Decolorizing- 95% ethanol을 떨어뜨리고 5~…(To be continued )
실험과제/생물의학
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다. 양성균 세포벽에는 teichoic acid가 존재하여 탈색제로부터 보호 작용을 하여 crystal violet이 남아있게 된다 그러나 너무 오래 탈색하거나 old culture된 세균은 거의 Gram 음성균으로 나타나기 쉬우므로 특히 탈색에 주의하여야 한다.
∞ 세균의 세포벽에 착색된 crystal violet이 탈색제에 의해 저항성을 나타내어 보라색을 띠면 양성균이라 하고, crystal violet이 탈색된 후 대조 염색제인 safranin으로 염색되어 빨간색을 띠는 것을 음성균이라 한다.
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식품 미생물 및 test(실험) - Gram 염색
1. test(실험) 목적 및 원리
∞ 균을 염색하여 색깔로 Gram 양성균과 음성균을 구분한다.
